[자연과학][工學(공학) 생물학] 브래드포드 단백질 정량법[The Bradford Method for Protein Quan…
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작성일 20-07-22 19:50본문
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4. 서론
Bradford Method는 산성 용액에서 불그스름한 갈색을 띄는 Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG) 염료의 흡광도 alteration(변화) 를 측정(測定) 한다. CBBG의 음이온이 단백질의 양이온 부분과 정전기적 인력에 의한 결합을 한다.
각각 시료를 1.5㎖ cuvettes에 1㎖씩 넣는다.
diluted milk를 5㎕씩 ep tube에 넣는다.
Engineering 생물학 및 實驗(실험) 레포트(report)
1. title
The Bradford Method for Protein Quantitation
2. 준비물
Bradford 시약
Protein Standard Solution
Spectrophotometer와 Quartz cuvette, Pipet
Milk, 증류수
ep tube
BSA Protein(standard)
3. 實驗(실험) 과정
Milk를 증류수를 이용하여 , , 원액의 비율로 dilution한다. CBBG가 free dye형태로 있을 때의 최대 흡광은 465㎚(빨강)이지만, 단백질의 아미노산과 결합하여 anionic form일 때의 최대 흡광도은 595㎚(파랑)인 점을 이용한다. 각각의 Protein 분자에 결합된 CBBG dye의 수는 대략 Protein 에 있는 양이온 수와 비례한다.
7.595㎚ 파장에서 Standard Solution의 흡광도를 측정(測定) 한 후 기록한다. 단백질에 결합한 CBBG는 용액을 갈색에서 푸른색으로 변하게 한다.
거품이 나지 않도록 천천히 뒤집으며 섞는다. 595nm에서의 흡광도는 단백질의 농도와 비례하게 된다된다. 하지만 단백질의 종류, 즉 아미노산의…(skip)
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[자연과학][工學(공학) 생물학] 브래드포드 단백질 정량법[The Bradford Method for Protein Quantitation]
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다.
나머지 시료의 흡광도를 측정(測定) 한 후 기록한다.
Bradford Method는 매우 빠르고 비용이 낮다는 長點이 있으며, 생체고분자 물질 중 단백질에 매우 특이적이다.
Standard Soulution을 0㎕, 2㎕, 4㎕, 6㎕씩 tube에 넣는다.
Bradford 시약을 1㎖씩 ep tube에 7개 넣는다.