[의학,약학] [생물학 실험] DNA의 분리 실험
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작성일 20-11-26 23:59
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2. Bacteria가 자란 LB중 1ml을 E-tube로 옮긴다.
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실험결과/생물의학
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다. 박테리아 플라스미드는 비교적 작고, 염색체로부터 분리된 상태로 복제하는 원형의 DNA라는 것을 설명(說明)하였다. 플라스미드는 몇 개의 우전자만 가지고 있고 특정조건에서 박테리아를 배양할 때 유용하게 사용된다 test(실험) 실에서 유전자나 DNA 절편을 클로닝하기 위해서는, 먼저 플라스미드를 박테리아에서 분리한 후 외분의 DNA를 플라스미드에 집어넣는다. 여기서는 유전자 재조합 DNA가 들어있는 대장균으로부터 직접 플라스미드를 추출하여 다음 test(실험) 에 이용할 표본을 만들어 놓는다.
2.Materials
-Echerichia coli(Competent cell : DH5α), plasmid DNA(pUC19 vector
-마이크로 피펫, 소형 원심분리기, E-tube, Ice, plasmid DNA purification kit
-Buffer 조성
Resuspension buffer
50mM glucose, 25mM TrisCl (pH 8.0), 10mM EDTA (pH 8.0), RNase A
Lysis buffer
0.2N NaOH, 1% SDS
Neutralization buffer
5M potassium acetate, glacial acetic acid
3.Method
1. colony 1개를 Antibiotics(예 - Ampicillin)가 포함된 liquid LB 5ml에 접종하고
37도℃ shaking incubator에서 12~16시간(O/N) 키운다.
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[의학,약학] [생물학 실험] DNA의 분리 실험
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1. Abstract & Introduction
DNA 절편을 클로닝하기 위한 방법들의 공통된 특징 중 하나는 박테리아와 플리스미드를 이용하는 것이다.
이번 test(실험) 은 박테리아에서 플라스미드를 추출해 내는 test(실험) 으로 이렇게 적은 양의 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 추출하는 방법을 miniprep라고 한다.
